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幾種粗脂肪測(cè)定方法的優(yōu)缺點(diǎn)

幾種粗脂肪測(cè)定方法的優(yōu)缺點(diǎn)

摘要：綜述了飼料粗脂肪分析測(cè)定的常用方法。結(jié)合筆者自身工作經(jīng)驗(yàn)。闡述了飼料粗脂肪分析測(cè)定常用方法各自的優(yōu)缺點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：粗脂肪分析測(cè)定

粗脂肪是飼料中的重要營(yíng)養(yǎng)素，飼料中的粗脂肪含量是評(píng)價(jià)飼料質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)之一。飼料脂肪的測(cè)定，通常是將試樣放在特定.的儀器中，用脂溶性溶劑(乙醚、氯仿、石油醚等)反復(fù)浸提試樣、稱量提取物的重量，因在提取物中除脂肪外，還有有機(jī)酸、磷脂、脂溶性維生素、葉綠素等，所以提取物稱為粗脂肪或乙醚提取物。測(cè)定粗脂肪的方法很多。本文就目前應(yīng)用較多的幾種方法進(jìn)行分析，比較其各自的優(yōu)缺點(diǎn)，以為讀者選擇恰當(dāng)測(cè)定方法提供一點(diǎn)幫助。

基本原理：根據(jù)飼料中的油脂均可溶解于乙醚中，故用無(wú)水乙醚反復(fù)浸提飼料中的脂肪，使脂肪全部溶解于乙醚中，然后將乙醚蒸發(fā).瓶中所剩殘?jiān)�的重量即為飼料的粗脂肪含量�?/P>

l油重法(或抽提瓶增重法)

1.1 原理

試樣在抽提管中反復(fù)抽提，直到脂肪抽提干凈，抽提瓶的增重即為樣品所含粗脂肪重量。

1.2 材料方法

索氏脂肪提取器、分析天平、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、水浴鍋、乙醚等。

索氏提取器應(yīng)干燥無(wú)水：抽提瓶在105±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷卻30min，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質(zhì)量之差小于0.00089為恒重。

　　稱取試樣l～59(準(zhǔn)確至O.0002曲，置于濾紙筒中或用濾紙包好.濾紙包應(yīng)低于提取器虹吸管的高度，并應(yīng)全部浸泡于乙醚中，將濾紙包放人抽提管，在抽提瓶中加無(wú)水乙醚，在60～75℃的水浴加熱，70次為抽提終點(diǎn)(或以抽提管流出的乙醚揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點(diǎn))。

取出試樣，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶?jī)?nèi)的乙醚被全部收完.取下抽提瓶。在水浴鍋上蒸除殘留乙醚。擦凈外壁，將抽提瓶放人105±2℃烘箱中烘干120min，燥器中冷卻30min，稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質(zhì)量差小于0.0019為恒重，抽提瓶前后重量之差為粗脂肪含量。

1.3 優(yōu)點(diǎn)

1.3.1 樣品含有的粗脂肪，完全被抽提瓶回收，可以進(jìn)一步分析樣品脂肪酸組成，及脂肪酸品。

1.3.2 整個(gè)過(guò)程在樣品絕干狀態(tài)下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生誤差的機(jī)會(huì)小。

1.4 缺點(diǎn)

1.4.1 長(zhǎng)時(shí)間烘干，抽提瓶會(huì)在恒重之后又增重。主要原因是粗脂肪有可能在抽提瓶發(fā)生氧化反應(yīng)而使重量增加，粗脂肪品質(zhì)發(fā)生變化。

1.4.2 抽提瓶重量、體積均較大.在分析天平上稱量時(shí)有一定的困難。

1.4.3 實(shí)驗(yàn)一次想進(jìn)行多個(gè)樣品�；蜃龆嘟M重復(fù)時(shí)，需要的提取器相應(yīng)增多，不利于同時(shí)進(jìn)行，在實(shí)驗(yàn)性教學(xué)上不方便。

1.4.4 時(shí)間長(zhǎng)，危險(xiǎn)大，整個(gè)實(shí)驗(yàn)完成大概要8h左右。乙醚有毒，易揮發(fā)，大量吸人頭暈、眼酸、腹瀉。有些情況下還可能燃燒。

2 殘余法(或?yàn)V紙包減重法)

2.1 原理

試樣在抽提管中反復(fù)抽提。直到脂肪抽提干凈，濾紙包的減重即為樣品所含粗脂肪重量。

2.2 材料方法

同上法前半部分取出試樣。仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶?jī)?nèi)的乙醚被全部收完，將樣品包放人105±2℃烘箱中烘干120min。燥器中冷卻30min，稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質(zhì)量差小于0.0019為恒重，濾紙包前后重量之差為樣品粗脂肪含量。

2.3 優(yōu)點(diǎn)

2.3.1 一個(gè)抽提管可以盛多個(gè)樣品包(只需在樣包上用鉛筆做出標(biāo)記即可)，有利于同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣品，或進(jìn)行多組重復(fù)。適合教學(xué)實(shí)驗(yàn)用。

2.3.2 濾紙包中的樣品經(jīng)過(guò)脫脂處理，可以進(jìn)行其他相關(guān)養(yǎng)分的分析測(cè)定。省去再脫脂的步驟。

2.4 缺點(diǎn)

2.4.1 濾紙包在稱量過(guò)程中，由于是絕干狀態(tài)。很容易吸潮，在分析天平上很難平衡。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。，

2.4.2 實(shí)驗(yàn)不能進(jìn)一步分析樣品中粗脂肪的品質(zhì)及組成.因?yàn)椴荒芮宄�粗脂肪�?lái)源于哪個(gè)樣包，哪種樣品。

2.4.3 同1.4.4。

3濾袋技術(shù)測(cè)定粗脂肪

濾袋技術(shù)(Filter Bag Technology，F(xiàn)BT)用于批量分析飼料中的纖維含量的推廣。使ANKOM Technology在1993年準(zhǔn)確測(cè)定酸性洗滌纖維(Acid Detergent Fiber，ADF)，中性洗滌纖維(Neutral Detergent Fiber，XDF)和粗纖維(Crude.Fiber;CF)�；�于在纖維分析方面已獲得的經(jīng)驗(yàn)，ANKOM Technology新近又開(kāi)發(fā)了一項(xiàng)快速批抽提脂肪技術(shù)(Accelerated Batch Extraction，ABE)、ANKOM xT20脂肪分析儀是采用ANKOM技術(shù)開(kāi)發(fā)的一項(xiàng)使用普通溶劑快速抽提食品和飼料脂肪的新技術(shù)而研制成的。

3.1 原理

ABE的原理十分簡(jiǎn)單。樣品被分裝在一種用特殊材料制作的濾袋中，在溶劑的作用下，脂肪溶解透出濾袋。而樣品基質(zhì)顆粒不能通過(guò)濾袋而留在濾袋中.從而實(shí)現(xiàn)脂肪與樣品基質(zhì)的分離。

3.2 材料方法

ANKOM X120脂肪分析儀、XT20濾袋、石油醚、封口機(jī)稱取1～39代表性樣品于已知重量的XT20濾袋中，封口。將盛有樣品的濾袋擺放在XT20樣品架上。將XT20樣品架放入分析儀的抽提缸中。按UD按扭關(guān)閉抽提缸蓋。從操作控制臺(tái)(OperatorControlStation，OCS)上選擇程序方式。按“Auto Star”自動(dòng)開(kāi)始。一旦一個(gè)程序或者手動(dòng)輸入設(shè)定被選中。儀器會(huì)開(kāi)始所有的所需步驟。當(dāng)抽提過(guò)程完成后。XT20—OCS將顯示“Test Complete—Remove Sample.”(測(cè)試結(jié)束，移去樣品)。將濾袋置于100℃條件下干燥lh，并稱重。濾袋前后重量之差即為樣品粗脂肪含量。

3.3 優(yōu)點(diǎn)

3.3.1 高效。一次能用不同的方式完成20個(gè)樣品的抽提，多數(shù)情況下，30～50min內(nèi)完成抽提，適合要求準(zhǔn)確、精密和快速的測(cè)定粗脂肪的實(shí)驗(yàn)室采用。

3.3.2 安全，使石油醚代替乙醚，沸點(diǎn)升高，每個(gè)操作環(huán)節(jié)都有安全保證裝置，不易發(fā)生爆炸、燃燒。

3.4 缺點(diǎn)

該套儀器設(shè)備，目前價(jià)格昂貴，國(guó)內(nèi)只有少數(shù)科研院所有，不易在大規(guī)模的飼料分析實(shí)驗(yàn)中采用。

4 脂肪測(cè)定儀測(cè)

4.1 原理

仍然是經(jīng)典的索氏提取法.但又將浸提過(guò)程分為高溫沸騰浸提和沖洗兩個(gè)步驟。浸提時(shí)間大為縮短。

4.2 材料方法

海能SOX500型脂肪測(cè)定儀(配濾紙簡(jiǎn))，分析天平，烘箱，無(wú)水乙醚。根據(jù)樣品的脂肪含量，準(zhǔn)確稱取過(guò)40目篩的樣品2～59，放人濾紙筒內(nèi)，烘干樣品，把濾紙筒放到脂肪測(cè)定儀中。樣品提取杯中加人50mL無(wú)水乙醚，放到儀器的加熱板上。壓下連接手柄，使提取杯與回流器密封連接。接通冷凝水。將濾紙筒通過(guò)滑桿放人提取杯中，，打開(kāi)電源，5min內(nèi)乙醚沸騰，樣品進(jìn)行高溫浸提，提取lh后，拉動(dòng)滑桿，將濾紙筒從提取杯中提升出來(lái)。用回流冷凝的乙醚淋洗樣品殘余的脂肪30min，關(guān)閉淋洗閥門，開(kāi)始回收乙醚，約5min乙醚回收完畢，取下提取杯，在105℃烘干至恒重，提取杯增重即為粗脂肪的含量。

4.3 優(yōu)點(diǎn)

4.3.1 脂肪測(cè)定儀測(cè)定的不同樣品所取得的結(jié)果來(lái)看，其精密度、準(zhǔn)確度都很好，說(shuō)明用脂肪測(cè)定儀測(cè)定的結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

4.3.2 用脂肪測(cè)定儀測(cè)定的速度快。當(dāng)天可完成整個(gè)測(cè)定過(guò)程，取得測(cè)定結(jié)果，并且可同時(shí)測(cè)定6個(gè)試樣。與經(jīng)典方法比較大大提高了效率、簡(jiǎn)化了操作、降低了成本、節(jié)省了能源，能較好地滿足日常生產(chǎn)和商貿(mào)交易工作中對(duì)脂肪含量測(cè)定的需要。