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凱氏定氮法概述

  凱氏定氮法（簡(jiǎn)稱凱氮法，英語：Kjeldahl method,全稱凱耶達(dá)爾定氮法），是分析化學(xué)中一種常用的確定有機(jī)化合物中氮含量的檢測(cè)方法。這種方法是由凱耶達(dá)爾在1883年發(fā)明的

     它的原理是：將有機(jī)化合物與硫酸共熱使其中的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。在此過程中經(jīng)常會(huì)向混合物中加入硫酸鉀來提高中間產(chǎn)物的沸點(diǎn)。此反映過程的終點(diǎn)很好判斷，因?yàn)榇朔从硶?huì)由開始的很暗變的無色且透明。
在得到的溶液中加入少量氫氧化鈉，然后蒸餾。這一步會(huì)將銨鹽轉(zhuǎn)化成氨。而總氨量（由樣本的含氮量直接決定）會(huì)由反滴定確定：冷凝管的末端會(huì)浸在硼酸溶液中。氨會(huì)和酸反應(yīng)，而過量的酸則會(huì)在甲基橙的指示下用碳酸鈉。滴定所得的結(jié)果乘以特定的轉(zhuǎn)換因子就可以得到結(jié)果
    通過凱氏定氮法測(cè)得的含氮量一般被稱作總凱氮量�？倓P氮量有時(shí)并不能真正地反映樣本中的蛋白質(zhì)含量，因?yàn)樗鶞y(cè)定的部分含氮量可能不是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化來的。
    樣本的分解： 蛋白質(zhì) + H2SO4 → (NH4)2SO4(aq) + CO2(g) + SO2(g) + H2O(g)
    銨鹽的分解： (NH4)2SO4(aq) + 2NaOH → Na2SO4(aq) + 2H2O(l) + 2NH3(g)
    氨的固定： B(OH)3 + H2O + NH3 → NH4+ + B(OH)4
    返滴定： B(OH)3 + H2O + Na2CO3 → NaHCO3(aq) + NaB(OH)4(aq) + CO2(g) + H2O
    如今，凱氏定氮法已經(jīng)可以自動(dòng)進(jìn)行，一些催化劑（如氧化汞或硫酸銅）也被使用來提高反映速率。
    轉(zhuǎn)換因子
    轉(zhuǎn)換因子是通過凱氏定氮法測(cè)得的氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。理想狀態(tài)下的蛋白質(zhì)中的氮含量約為16%，所以測(cè)量值乘以6.25即為蛋白質(zhì)量。

     凱氏定氮的應(yīng)用
     凱氏定氮法以它的可重復(fù)性、精確性和普遍適用性已經(jīng)得到了國際的廣泛認(rèn)可。它已經(jīng)被確定為檢測(cè)食物中蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)方法。但是，這種方法并不能準(zhǔn)確的測(cè)定出食品中蛋白質(zhì)的含量，因?yàn)榇朔椒�測(cè)定的氮可能不全是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變來的。2007年的美國寵物食品污染事件和2008年的中國毒奶粉事件中體現(xiàn)：三聚氰胺，一種含氮量較高的物質(zhì)，被添加到了食品中以偽造較高的含氮量。另外，由于不同的氨基酸序列，這種方法也需要許多不同的校正因子。而且，凱氏定氮法還需要使用濃硫酸和較長時(shí)間的加熱（一般來講，大于1小時(shí)）。這也造成了在粗略測(cè)量蛋白質(zhì)含量時(shí)，杜馬斯法有時(shí)更方便些。