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牛奶是一種營(yíng)養(yǎng)豐富，易于人體消化吸收的食品。其營(yíng)養(yǎng)成分全面，主要的化學(xué)成分包括：水，脂肪，蛋白質(zhì)，糖類(lèi)，無(wú)機(jī)鹽等。雖然牛奶中的糖類(lèi)物質(zhì)種類(lèi)繁多，但其中99.8%為乳糖，通常測(cè)定牛奶中總糖的含量來(lái)近似評(píng)價(jià)牛奶中乳糖的含量。目前乳糖的常規(guī)檢測(cè)方法仍采用國(guó)標(biāo)中的直接滴定法。該方法操作繁瑣，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。因此，建立一個(gè)快速、靈敏且簡(jiǎn)單易行的乳糖測(cè)定方法，對(duì)乳制品行業(yè)具有重大意義。

1.      實(shí)驗(yàn)原理與材料

1.1 原理：乳糖是一種光活性物質(zhì)，利用旋光儀在波長(zhǎng)589.3~589.4 nm處測(cè)量其旋光度即可求出乳糖的含量。計(jì)算公式：

 

1.2 試劑：純牛奶（市售），

乳糖（AR），

21.9%乙酸鋅溶液：稱(chēng)取21.9g乙酸鋅，加水溶解并稀釋至100 ml，

10.6%亞鐵氰化鉀溶液：稱(chēng)取10.6g亞鐵氰化鉀，加水溶解并稀釋至100 ml。

1.3 儀器：全自動(dòng)旋光儀 P850 (海能儀器)

2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論：

2.1 比旋度的測(cè)定：

取純品乳糖，在80℃干燥2 小時(shí)后，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含本品0.10g 與氨試液0.02ml的溶液，測(cè)其比旋度。

2.2 牛奶中乳糖含量的測(cè)定：

準(zhǔn)確吸取50ml消毒牛奶于100ml容量瓶中，加入乙酸鋅溶液、亞鐵氫化鉀溶液及冰乙酸各2 ml．混合均勻后室溫下靜置30min，用干燥濾紙過(guò)濾，棄去初濾液，用1dm旋光管測(cè)定。記錄旋光度，代入公式，算出溶液中乳糖含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 牛奶中乳糖含量的測(cè)定結(jié)果

 

1

2

3

平均值

乳糖含量

（g/100 ml）

4.97

4.96

4.96

4.96

 

2.3 精密度實(shí)驗(yàn)：

配制4%濃度的乳糖標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，平行測(cè)定5次。結(jié)果見(jiàn)表2。

表２　精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

乳糖濃度

測(cè)量值

平均值

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

4%

4.05

4.06

0.11

 

4.06

 

 

 

4.06

 

 

 

4.06

 

 

 

4.06

 

 

結(jié)果表明，儀器的重現(xiàn)性良好。

3.      結(jié)論

旋光法能夠快速、準(zhǔn)確的測(cè)定牛奶中乳糖的含量，不需要復(fù)雜的儀器和設(shè)備，符合乳品加工企業(yè)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)和基層實(shí)驗(yàn)室工作的需要，具有實(shí)用意義。